【单选题】

单向琼脂扩散试验时错误的做法是（ ） 。

A. 琼脂糖煮化后应立即加入抗血清， 以免琼脂凝固
B. 试验时应加入标准抗原作为参考
C. 每次测定必须做标准曲线
D. 采用特异性强效价高的抗血清
E. 放置于 37℃反应， 24～48 小时后观察结果